基孔肯雅熱主要分布于冬季氣溫18℃以上的非洲及東南亞熱帶及亞熱帶地區(qū)。它是一種類似于登革熱的蟲媒傳染病,自2013年底在加勒比海區(qū)域出現(xiàn)病例后現(xiàn)已蔓延到加勒比海周邊及美國。為指導(dǎo)臨床醫(yī)生和傳染病預(yù)防控制專業(yè)人員做好基孔肯雅熱輸入疫情的監(jiān)控,做好蚊媒密度監(jiān)測和控制,有效防范和處置疾病的本地傳播和流行,制定本技術(shù)指南。
基孔肯雅熱試劑基于ELISA技術(shù)。包被板中包被了抗人IgG抗體,如果人血清或血漿中含有IgG時(shí),則會(huì)與其特異性結(jié)合,洗板將未結(jié)合的物質(zhì)洗去,然后加入基孔肯雅抗原溶液,洗板洗去未結(jié)合的物質(zhì),然后加入鏈霉親和素和基孔肯雅抗體酶聯(lián)物。洗板后,加入TMB底物液,顏色變成藍(lán)色,加入終止液終止反應(yīng),顏色由藍(lán)色轉(zhuǎn)為黃色,zui后用酶標(biāo)儀在450nm處讀數(shù)。基孔肯雅熱試劑的組成包括以下幾種:
包被板:12×8可拆卸,包被了抗人IgG抗體,密封在可重封鋁箔袋中
基孔肯雅溶液1:1瓶包含6mL的基孔肯雅抗原溶液,即用,白蓋
基孔肯雅溶液2:1瓶包含6mL的生物素化的基孔肯雅抗體,即用,藍(lán)色,白蓋
基孔肯雅IgM陽性質(zhì)控:1瓶,1.5mL,黃色,即用,紅蓋
基孔肯雅IgM臨界質(zhì)控:1瓶,2mL,黃色,即用,綠蓋
基孔肯雅IgM陰性質(zhì)控:1瓶,1.5mL,黃色,即用,藍(lán)蓋
樣本稀釋液:1瓶包含100mL的即用緩沖液,用于稀釋樣本,pH7.2±0.2,黃色,白蓋
洗滌液:1瓶,包含50mL20倍濃縮的緩沖液,(pH7.2±0.2)用于洗板,白蓋
鏈霉親和素結(jié)合液:1瓶包含6mL過氧化物酶結(jié)合的鏈霉親和素,即用,紅色,黑蓋
TMB底物液:1瓶包含15mLTMB,即用,黃蓋
終止液:1瓶包含15mL,即用,內(nèi)含硫酸,0.2mol/l,紅蓋