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利什曼蟲膠體金試紙條

利什曼蟲膠體金試紙條

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黑熱病膠體金試紙條

  • 產(chǎn)品描述

預(yù)期使用

    該檢測(cè)條用于診斷內(nèi)臟利什曼病,利用快速的免疫層析法在人血清中定性檢測(cè)杜氏利什曼原蟲(L. donovani)抗體。該實(shí)驗(yàn)有助于診斷內(nèi)臟利什曼病(VL)。并只用于體外診斷。

實(shí)驗(yàn)原理

  該檢測(cè)條的硝化纖維膜在實(shí)驗(yàn)區(qū)包被了rK39,在質(zhì)控區(qū)包被了雞抗蛋白A。在實(shí)驗(yàn)中,血清樣本與膠體金共軛物(膠體金標(biāo)記的蛋白A)反應(yīng),而膠體金共軛物預(yù)先包被在檢測(cè)條上?;旌衔镌诿?xì)管作用下沿著硝化纖維膜移動(dòng),然后與重組的VL抗原反應(yīng),并生成一條紅色帶。如果存在該紅色帶表明陽(yáng)性結(jié)果,反之則為陰性結(jié)果。混合物繼續(xù)移動(dòng),到達(dá)固化的雞抗蛋白A區(qū)(質(zhì)控區(qū)),會(huì)在質(zhì)控區(qū)生成一條紅色帶。質(zhì)控區(qū)紅色帶的出現(xiàn)說明樣本體積充足、液體流動(dòng)適宜和作為對(duì)試劑的質(zhì)控。

保存方法

    該密封袋或者瓶中含實(shí)驗(yàn)檢測(cè)條應(yīng)保存在2028℃(室溫)直至有效期。瓶中含捕獲緩沖液也應(yīng)保存在2028℃。暴露在超過30℃溫度下會(huì)影響實(shí)驗(yàn)性能,所以應(yīng)盡量避免。檢測(cè)條不應(yīng)冰凍保存。從密封袋中取出后應(yīng)在1小時(shí)內(nèi)使用,避免受濕度影響。

血清的采集

1該實(shí)驗(yàn)中應(yīng)使用人血清。全血樣本不應(yīng)采用,因?yàn)檫^度的背景可能會(huì)影響正確讀取實(shí)驗(yàn)帶。應(yīng)使用緩沖液稀釋血清,避免直接開始實(shí)驗(yàn)。陽(yáng)性血清應(yīng)使用陰性血清進(jìn)行稀釋。

經(jīng)凝血后離心分離血清,盡量避免溶血。

應(yīng)在采集血清后盡快開展實(shí)驗(yàn)。血清不能長(zhǎng)時(shí)間存放在室溫下。血清于2-8℃可保存3天。否則血清應(yīng)保存在20℃以下。

實(shí)驗(yàn)前血清平衡至室溫。冰凍的血清必須充分融解。血清避免反復(fù)凍融。

如果血清需要運(yùn)輸,其包裝應(yīng)該符合聯(lián)邦的傳染源運(yùn)輸法規(guī)。

試劑盒成分

該黑熱病快速檢測(cè)條的硝化纖維膜在實(shí)驗(yàn)區(qū)包被了重組的rK39,在質(zhì)控區(qū)包被了雞抗蛋白A。試劑盒的成分如下:

125份的獨(dú)立包裝檢測(cè)條或者25份檢測(cè)條于一個(gè)含干燥劑瓶子中。

21瓶的捕獲緩沖液

實(shí)驗(yàn)步驟

實(shí)驗(yàn)前讓血清平衡至室溫。

從密封袋或瓶中取出黑熱病快速檢測(cè)條

在檢測(cè)條箭頭下方加入20 ul的血清。

將檢測(cè)條置于實(shí)驗(yàn)管中,或者96孔的組織培養(yǎng)板的微孔中,根據(jù)檢測(cè)條上的箭頭,其末端應(yīng)該朝下。

加入2-3滴(150ul)的捕獲緩沖液

10分鐘內(nèi)讀取結(jié)果。在讀取結(jié)果前,背景的清晰是十分重要的。尤其是當(dāng)樣本為低滴度的抗利什曼原蟲抗體時(shí),就只有一條很弱的色帶出現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)區(qū)(T)。10分鐘后讀取可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。

注意:不要只是加入捕獲緩沖液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。必須首先加入20ul的血清。

      如果在加入捕獲緩沖液后的10-15秒并沒有觀察到膠體金的移動(dòng),可輕輕壓檢測(cè)條上的樣本加入?yún)^(qū),直到觀察到膠體金的移動(dòng)。

結(jié)果解釋

陽(yáng)性結(jié)果

實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性則質(zhì)控帶和實(shí)驗(yàn)帶均出現(xiàn),如圖1。陽(yáng)性結(jié)果表明檢測(cè)到杜氏利什曼原蟲抗體。一條微弱的色帶也為陽(yáng)性結(jié)果。作為解釋指南,實(shí)驗(yàn)區(qū)的紅色帶的顏色強(qiáng)度與抗利什曼原蟲抗體濃度相關(guān)。實(shí)驗(yàn)帶為“弱陽(yáng)性"血清樣本,實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能為弱陽(yáng)性紅色帶與紅點(diǎn)之間,幾乎為白色背景(“弱陽(yáng)性"樣本則含有對(duì)重組抗原低親和力或者低滴度抗體)。

陰性結(jié)果

實(shí)驗(yàn)為陰性,則只有質(zhì)控帶出現(xiàn)。一個(gè)陰性結(jié)果表明無(wú)檢測(cè)到杜氏利什曼原蟲抗體。沒有出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)帶,如圖2。

無(wú)效結(jié)果

則無(wú)出現(xiàn)質(zhì)控帶也沒有出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)帶。如果沒有出現(xiàn)質(zhì)控帶該實(shí)驗(yàn)也無(wú)效,即使出現(xiàn)了實(shí)驗(yàn)帶。建議使用新的檢測(cè)條和新血清再次進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

注意:實(shí)驗(yàn)區(qū)的紅色帶的變化是依賴于抗利什曼原蟲抗體濃度。然而,該實(shí)驗(yàn)不能檢測(cè)抗體的定量值和增加的百分比。

預(yù)期值:

在流行的地區(qū),該黑熱病快速檢測(cè)條靈敏度為90%或更高。而特異性可能因不能地區(qū)而不同。例如在印度104名健康人中超過13名為陽(yáng)性反應(yīng)。

本譯文由廣州健侖生物科技有限公司編譯,僅供參考,請(qǐng)以原說明書為準(zhǔn)或與我們公司工作人員!

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